弊社が所有する
細胞培養上清の解析データを、
研究の基礎資料として公開しています。
報告書の概要と、
解析データの閲覧方法をご案内します。
報告書の概要
研究報告書
幹細胞培養上清由来
エクソソームの
miRNA 組成および
標的パスウェイ予測の比較
脂肪・歯髄・羊膜・臍帯血・
骨髄・胎盤由来
6 検体のデータ報告
| 版 | ver1.06(公開前レビュー版) |
|---|---|
| 作成日 | 2026 年 10 月 7 日 |
| 報告書署名 | 株式会社エス・シー・シー・ラボ/ BiOStyle Clinic Osaka |
| データ所有者 | 株式会社エス・シー・シー・ラボ |
| 解析受託 | 株式会社オーダーメードメディカルリサーチ |
| 構成 | 4 部 19 章と付録 A〜H。 全 92 ページと、 解析データ(Excel)・図 |
脂肪・歯髄・羊膜・臍帯血・骨髄・胎盤の
6 種の幹細胞培養上清から回収した
細胞外小胞(EV)の miRNA を、
次世代シーケンスで定量しました。
標的遺伝子予測、GO 解析、
パスウェイ解析により、
由来細胞ごとの miRNA 組成と
調節の特徴を評価した報告書です。
新規の実験ではなく、
既存データの整理と再解析で、
生リードからパスウェイの統計表まで
全工程の出力を保存し、
再解析ができる形にしています。
報告書の目次
報告書は 4 部 19 章と
付録 A〜H で構成されています。
第Ⅰ部 共通基盤
- 第1章序論(背景・目的・本報告の位置づけ・規制と学会の見解)
- 第2章試料と実験デザイン
- 第3章解析方法
- 第4章データ資源と出所
第Ⅱ部 目的別の解析
- 第5章目的A:品質・同一性の評価
- 第6章目的B:由来細胞間の組成比較
- 第7章目的C-1:標的遺伝子と GO 解析
- 第8章目的C-2:パスウェイ解析
- 第9章目的D:がん関連の評価
- 第10章目的E:二次利用と再解析のための整理
第Ⅲ部 整理パターン別の比較ビュー
- 第11章比較ビュー 1:検体別プロファイル
- 第12章比較ビュー 2:パスウェイカテゴリ別
- 第13章比較ビュー 3:miRNA ファミリー別
- 第14章比較ビュー 4:研究テーマ別
- 第15章比較ビュー 5:検体ペアの差分
第Ⅳ部 評価
- 第16章由来細胞間の違いの総合
- 第17章SCCL による寸評
- 第18章限界
- 第19章結論と今後
付録・巻末
- 付録 A用語解説
- 付録 B有意パスウェイ 200 件の一覧
- 付録 C検体特異的パスウェイ(96 件)
- 付録 DQC 数値の全体
- 付録 E標的候補を支える miRNA(上位 40)
- 付録 FGO term の一覧(72 件)
- 付録 G200 パスウェイの z スコア(6 検体)
- 付録 Hデータの出所、構成、再現手順
- 巻末参考文献/利益相反・免責/参照・引用時の出典表記について
解析の流れ

試料と解析方法
6 種の由来細胞の培養上清を各 16 mL 用い、
エクソソーム画分から
small RNA を抽出しました。
ライブラリは QIAseq miRNA UDI で調製し、
NextSeq(シングルエンド 75 bp)で
シーケンスしました。
| 検体 | D001-AD 脂肪、D002-DP 歯髄、D003-AM 羊膜、D004-CB 臍帯血、D005-BM 骨髄、D006-PL 胎盤(各 16 mL、反復なし n=1) |
|---|---|
| small RNA 量 | 138〜346 ng(A260/A280 1.5〜1.8)。培養上清 1 mL あたり 8.6〜21.6 ng |
| ライブラリ | QIAseq miRNA UDI。平均ライブラリ長 199〜203 bp、ライブラリ濃度 43.9〜79.5 nM |
| シーケンス | NextSeq、シングルエンド 75 bp。入力リード 1,060 万〜1,491 万 |
| マッピング・定量 | CLC Genomics Workbench v25.0.1(ヒトゲノム hg38、miRBase 22)。CPM で正規化し、5 カウント以上の miRNA を後続解析に使用 |
| 標的遺伝子予測 | StrandNGS 4.0、TargetScan(p≦0.05) |
| GO 解析 | 超幾何分布、Benjamini–Hochberg 補正 |
| パスウェイ解析 | PathVisioRPC 1.2、WikiPathways(2015.05.12 版)。標的遺伝子に一律の変動値 FC=2.5 を付与 |
| 本報告での再計算 | Spearman 相関、Jaccard 係数、キーワード分類、がん関連の検討 |
数値の出所は、
A(原本ファイルから読み取り)、
B(委託先報告書から転記)、
C(本報告で再計算)の
3 区分で示しています。
主な結果
-
01
安定した miRNA 組成
6 由来すべてで解析に十分なリード(1,060 万〜1,491 万)が得られ、5 カウント以上の miRNA を 225〜351 種検出しました。上位 18 miRNA が全体の 74.9〜86.3 % を占め、少数の miRNA を中心とする安定した組成でした。腫瘍抑制性として知られる let-7 ファミリーは全由来で主要な構成要素の一つで、骨髄 63.8 %、歯髄 62.5 % と特に高い割合でした。
-
02
由来ごとの特徴
羊膜と臍帯血(Spearman 相関 0.96)、歯髄と骨髄(0.95)は、それぞれ近縁な組成を示しました。胎盤は C19MC 系を含む 51 種の固有 miRNA をもち、6 由来の中で最も個性的なプロファイルでした。脂肪は両グループの中間に位置します。
-
03
パスウェイの構成
有意なパスウェイは由来あたり 61〜85 件で、骨髄(85 件)と胎盤(76 件)が多い結果でした。6 由来に共通する 8 経路には腫瘍抑制性 miRNA の調節経路が含まれます。経路の構成は、骨髄と歯髄で免疫関連、羊膜と臍帯血で代謝と DNA 修復・細胞周期関連、胎盤で固有の経路(24 件)が多く、由来ごとに特徴が現れました。
-
04
がん関連の評価
本計測の範囲では、がん化の促進を示す所見は認められませんでした。がん遺伝子の発現上昇を示すデータは得られておらず、MYCN などのがん遺伝子は miRNA の標的候補として抑制方向の調節を受け得ると予測されました。

(報告書 第 6 章)


パスウェイ集合の Jaccard 係数
(報告書 第 8 章)
注目される経路(機能的示唆)
有意パスウェイを
機能の領域ごとに整理すると、
EV の miRNA が調節に関与し得る
生体機能として、
次の領域が浮かび上がりました
(報告書 第 8 章)。
いずれも miRNA の標的候補が
その経路に集積していることに
基づく予測です。
| ゲノムの維持・DNA 修復 | NIPBL による DNA 損傷応答と染色体構造の維持の経路は、6 由来すべてで有意(z=3.4〜5.6)。DNA 損傷応答と、miRNA による DNA 損傷応答の調節も 5 由来で有意。 |
|---|---|
| 細胞保護・恒常性 | 小胞体ストレス応答(脂肪)、分子シャペロン HSP70 によるアポトーシスの調節(骨髄・脂肪)、オートファジー(5 由来)が有意。 |
| 組織修復・血管 | ROBO4 による血管安定化と VEGF による血管新生の調整(羊膜・臍帯血)、力学刺激による YAP/TAZ の制御(骨髄・歯髄・胎盤)、腎の発生・再生に関わる Wnt シグナル(胎盤・臍帯血・羊膜)が有意。 |
| 免疫調節 | IL-26 による炎症応答の調節(骨髄・歯髄)と、VIP による免疫寛容の制御(歯髄・骨髄)が有意。骨髄と歯髄の EV が、免疫の調節に関わる経路に特徴をもつ。 |
| 代謝・抗酸化 | コレステロール生合成は 6 由来すべてで有意。老化応答に伴う NAD 代謝(臍帯血・脂肪・胎盤)と、抗酸化を支えるペントースリン酸経路(胎盤・臍帯血)も有意。 |
| 新たに見いだされた経路 | 運動で生じる代謝物 Lac-Phe による食欲と代謝の制御(6 由来すべてで有意)、運動による概日時計の調節(歯髄)、外胚葉(皮膚・神経)の分化(臍帯血・羊膜)、PRC2 によるエピジェネティック制御(胎盤・歯髄)など、一般に注目される領域の外にある経路も有意。 |
由来細胞ごとの特徴
| 脂肪(AD) | 腫瘍抑制 miRNA の調節経路が由来内で最も高い z スコア(5.9)。ほかの由来との中間的な組成で、比較の基準として扱いやすい。 |
|---|---|
| 歯髄(DP) | let-7 ファミリーの割合が 62.5 % と高く、免疫関連の経路が最も多い(19 件)。骨髄と近縁な組成。 |
| 羊膜(AM) | 検出した miRNA の種数が最も多く(351 種)、DNA 損傷・細胞周期関連の経路が多い。臍帯血と最も近い組成。 |
| 臍帯血(CB) | 上位 18 種への集中度が最も高い(86.3 %)。DNA 修復・細胞周期と発生・分化関連の経路が多い。 |
| 骨髄(BM) | 有意パスウェイ(85 件)と let-7 ファミリーの割合(63.8 %)がともに最も高く、免疫関連の経路も多い。調節を受ける経路の幅が最も広い。 |
| 胎盤(PL) | 固有の miRNA(51 種)と固有のパスウェイ(24 件)が最も多く、胎盤に特徴的な C19MC 系 miRNA を含む。ほかの由来と最も異なるプロファイル。 |
データの限界
本データは、
各由来 1 検体(n=1)の解析です。
結果の解釈には、
次の限界があります
(報告書 第 18 章)。
- 反復がないため、検体間差の統計的検定はできません。ドナー・ロット間の変動も不明です。
- 培地のみの対照がなく、培地・血清由来の RNA の寄与を分離できません。
- EV の粒子数・粒径・表面マーカーの特性評価データは含まれません。
- 標的遺伝子は TargetScan による予測で、抑制の有無は実験で確認していません。
- パスウェイの定義は WikiPathways 2015 年版です。最新版では経路の追加・改訂があります。
本データから導けるのは
「この 6 検体でどうであったか」
という記述で、
「由来細胞一般の性質」ではありません。
今後の課題
- 同一由来の複数ロット・複数ドナーでの再現性の確認
- 粒子数・粒径・マーカーによる EV の特性評価と、培地対照の追加
- 上位 miRNA の定量 PCR による確認と、受容細胞での標的遺伝子の発現解析
- 最新の経路データベースでの再解析
用語解説
| miRNA | 約 22 塩基の小さな RNA。標的 mRNA に結合して、遺伝子の発現を調節し得る。 |
|---|---|
| エクソソーム(EV) | 細胞が分泌する細胞外小胞の一群。内部に RNA・タンパク質を含む。本報告では、委託先の手順で回収した EV 画分の small RNA を指す。 |
| CPM | Counts Per Million。100 万リードあたりのカウント。シーケンスの深さの違いを補正する。 |
| let-7 | miRNA ファミリー。増殖・分化の調節や腫瘍抑制との関連が報告されている。 |
| C19MC | 19 番染色体上の miRNA クラスター(miR-515〜526 など)。胎盤で高発現することが知られる。 |
| TargetScan | miRNA の標的遺伝子を配列から予測するプログラム。予測であり、実験で確認された標的ではない。 |
| GO(Gene Ontology) | 遺伝子の機能分類。生物学的プロセス、分子機能、細胞の構成要素の 3 つ。 |
| WikiPathways/PathVisio | コミュニティで編集されるパスウェイのデータベースと、その上でデータを可視化・統計解析するソフトウェア。 |
| z スコア | パスウェイに含まれる基準適合遺伝子の偏りの指標。「有意」は、置換検定で p≦0.05 かつ z>0 を満たすこと。 |
| Spearman 相関/Jaccard 係数 | 順位に基づく相関係数と、2 つの集合の共通部分÷和集合(0〜1)。検体間の類似度に使う。 |
| n=1 | 各条件 1 検体。反復なし。 |
公開している解析データ
報告書のもとになった解析データを、
編集できる形(Excel・CSV)と
生データのまま公開しています。
生リードからの再定量、
経路解析の再計算、
他のデータとの統合など、
二次利用・再解析にお使いいただけます。
| 生リード | FASTQ 6 ファイル(各検体シングルエンド 75 bp) |
|---|---|
| 品質管理 | FastQC・MultiQC のレポート(トリミング前後)、リード数の集計(Excel) |
| RNA・ライブラリ | 各検体の RNA とライブラリの電気泳動像 |
| PCA 解析 | PCA プロット、ヒートマップ、ユークリッド距離(CSV) |
| GO 解析 | 検体ごとの GO 解析結果(Excel・PDF) |
| パスウェイ解析 | 有意パスウェイの概要と検体特異的パスウェイ(Excel・PDF) |
| 解析レポート | 委託先の解析レポート、miRNA-Seq 解析結果と FastQC の説明(PDF) |
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- 題名:幹細胞培養上清由来エクソソームの miRNA 組成および標的パスウェイ予測の比較:脂肪・歯髄・羊膜・臍帯血・骨髄・胎盤由来 6 検体のデータ報告
- 報告書署名:株式会社エス・シー・シー・ラボ,BiOStyle Clinic Osaka
- 版と年:ver1.06,2026 年
- 入手元:このページ、または解析データのページの URL
- 改変の有無:図表や数値を加工した場合は、その旨
表記の例:株式会社エス・シー・シー・ラボ,BiOStyle Clinic Osaka.幹細胞培養上清由来エクソソームの miRNA 組成および標的パスウェイ予測の比較:脂肪・歯髄・羊膜・臍帯血・骨髄・胎盤由来 6 検体のデータ報告.ver1.06,2026.(入手元 URL)
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2026 年 11 月 6 日 制定
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